Большинство методик, диагностирующих инфекции, определяют наличие последних косвенно. Например, иммуноферментный анализ (ИФА) выявляет белки-маркеры, выделяющиеся при появлении в организме возбудителя. Но белки попадают в кровь не сразу, а через определенный промежуток времени. Для многих заболеваний этот период составляет до 6 месяцев, а в некоторых случаях до года. За это время микроб может причинить много вреда. Кроме того, похожие белки вырабатываются и в других случаях – при хроническом воспалении, аутоиммунных заболеваниях. Анализ может оказаться ложноположительным. А иногда складывается ситуация, когда заражение началось, а белков-маркеров нет. В результате получится ложноотрицательный результат. Преимущество ПЦР в том, что действие микробов определяется сразу, а не постфактум. При использовании этого метода практически исключены осечки.
Враг не пройдет
Посредством ПЦР определяется частичка самого возбудителя, то есть получает неопровержимое вещественное доказательство присутствия того или иного вируса или бактерии. Ведь даже самый маленький кусочек ДНК или РНК «вредителя» обладает уникальной последовательностью фрагментов. При использовании других методик нередки ошибки в связи с перекрестно-реагирующими антигенами. Для того чтобы метод ПЦР засек ДНК микроба, ему нужно минимальное количество клеток возбудителя. Например, для ИФА и микроскопического метода идентификации требуется более 100 клеток в пробе. Для ПЦР бывает достаточно 10. Поэтому ПЦР выявляет заболевание тогда, когда другие методы исследования его еще «не видят».
Щадящий режим
Одной пробирки крови хватает для выявления различных инфекций (более 20). Все дело в том, что фрагменты ДНК очень маленькие и нет причин, чтобы полностью не использовать взятую кровь. При других методах диагностики требуются дополнительные пробирки с кровью для обнаружения разных инфекций. Кроме того, обычно результаты ПЦР можно получить в течение суток, а современные аппараты могут выдать его в течение 4–5 часов. Большинство бактериологических методов основано на выращивании возбудителя в специальных средах, что занимает от 2 дней до недели.
Что сдаем?
- Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. Используются для диагностики заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), – гонореи, хламидиоза, микоплазмоза, цитомегаловируса и др.
- Моча. Берется для выявления тех же инфекций, но соскоб считается более информативным.
- Мокрота. Ее анализ проводится при диагностике туберкулеза и дыхательных форм хламидиоза и микоплазмоза. 15–20 мл мокроты собирают в стерильный пластиковый контейнер.
- Кровь. Сдается для диагностики вирусов гепатитов B, C, D, G, герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ, исследования генов человека.
- Другие биологические жидкости. Сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, слюна забираются для уточнения диагноза по назначению врача.
- Биоптаты (кусочки ткани). Их тоже исследуют в соответсвии с предполагаемым диагнозом по назначению врача. Например, биоптат стенки желудка исследуют на наличие хеликобактера – основного виновника язвенной болезни и рака желудка.
Дополнительные возможности
ПЦР используют в криминалистике для сравнения так называемых «генетических отпечатков пальцев». Необходим образец генетического материала с места преступления – кровь, слюна, сперма, волосы и т. п. Его сравнивают с генетическим материалом подозреваемого. Этот же метод можно применить для установления отцовства.